Conservation des souches :

1 ‑ Conservation des souches dans des cryotubes avec billes (ex: Technicals services UK ou AES)

TRAVAILLER STERILEMENT POUR TOUTE LA PROCEDURE

POUR DE BONS RESULTATS : UTILISER DES CULTURES JEUNES 48 ‑ 72H

A partir de culture sur milieu gélosé,

‑ prélever une ou plusieurs colonies avec une oese stérile, pour faire une suspension dense dans le liquide du tube,

‑ fermer le tube et retourner 6 fois,

‑ laisser le tube vertical sur un portoir 1 à 2 minutes,

‑ enlever la majorité du liquide au-dessus des billes avec une pipette stérile,

‑ fermer le tube, noter les informations sur le tube,

‑ conserver entre ‑70°C et ‑20°C.

II peut être plus facile de récupérer ensuite des billes si le tube est congelé horizontalement quelques minutes.

 

2 ‑ Culture à partir d'un cryotube

‑ sortir le tube du congélateur, récupérer une ou plusieurs billes (2 ou 3) avec un instrument stérile (oese ou pastette),

‑ ne pas recongeler les billes sorties,

‑ remettre au congélateur rapidement le cryotube sorti,

‑ rouler la ou les billes sur 1/3 d'un milieu de culture BCYE, (inclure la ou les billes dans la gélose) et finir avec un isolement,

‑ cultiver dans les conditions normales,

‑ lorsque la culture est visible (2 à 3 jours d'incubation) : suivre le protocole pour l'envoi au CNRL.